Qué pregunta responde
La espectrometría de masas (MS, por mass spectrometry) es la prueba de identidad. Mientras la pureza por HPLC te dice cuán limpia está la muestra, la MS te dice de qué molécula se trata. Es la diferencia entre "está limpio" y "es lo correcto": las dos cosas hacen falta, y son pruebas distintas.
Qué mide: la masa
La MS mide la masa de una molécula. Para hacerlo, la ioniza, es decir, le da carga eléctrica. Después analiza los iones por su relación masa/carga, m/z [1]. Esa medición es lo que ha convertido a la espectrometría de masas en la herramienta de referencia para identificar y caracterizar péptidos y proteínas con precisión [2]. El resultado, en el fondo, es un número: la masa de lo que hay en el vial.
Cómo confirma la identidad
Cada secuencia de aminoácidos tiene una masa exacta que puede calcularse de antemano: es la masa teórica del compuesto. La MS mide la masa real de la muestra y la compara con esa masa teórica. La coincidencia aporta evidencia de compatibilidad entre la masa observada y la esperada para ese péptido. Por eso la masa molecular aparece en la ficha de cada compuesto, es el valor contra el que se contrasta.
MS frente a HPLC
Se complementan: HPLC caracteriza la pureza por área y MS aporta la comparación de masas para evaluar identidad.
| HPLC | Espectrometría de masas | |
|---|---|---|
| Responde | ¿Qué tan puro? | ¿Qué es? |
| Mide | Pureza (% del área) | Peso molecular (masa) |
| Resultado | Cromatograma con picos | Masa observada vs teórica |
| En el COA | Pureza ≥ 99 % | Identidad confirmada |
Cómo aparece en el COA
En el certificado de análisis, la espectrometría de masas se reporta como la masa observada frente a la masa esperada del compuesto. Cuando ambas coinciden dentro del margen del método, el COA da la identidad por confirmada. Cómo leer el resto del certificado, y la pureza por HPLC, está en la guía de cómo leer un COA; el detalle de qué es un cromatograma y demás términos, en el glosario.