Qué absorbe a 214 nm en el detector UV
Cada residuo pesa distinto en la señal: el triptófano absorbe unas 30 veces más que un enlace peptídico; la fenilalanina, la tirosina y la histidina, unas seis veces más; la metionina, algo parecido al enlace, y la prolina dentro de la cadena, unas tres veces más 1. En el BPC-157, sin residuos aromáticos y con cuatro prolinas, la señal depende de sus enlaces peptídicos y de esas prolinas.
Área de pico y pureza
La pureza por HPLC divide el área del pico principal entre el área total, lo que supone una respuesta parecida de todos los componentes. Una impureza con más o menos residuos aromáticos que el péptido no da un área proporcional a su cantidad, y por eso la identidad se confirma aparte, con la masa por LC-MS.
Por qué 214 nm y no 280 nm
A 280 nm absorben el triptófano, la tirosina y la cistina, y el coeficiente de una proteína a esa longitud de onda se predice a partir de cuántos tiene 2. Un péptido corto sin esos residuos apenas absorbe ahí; cerca de 214 nm, en cambio, absorbe cualquier enlace peptídico 1.